Пипетка

Коллеги, продающие пипетки, часто получают запросы от рекомендованных клиентов: «Можете ли вы дать мне набор пипеток? Их можно использовать во всех диапазонах измерения, как набор из четырех штук». По желанию клиентов клиентам обычно рекомендуются пипетки с четырьмя диапазонами измерения: 0,5–10 мкл, 5–50 мкл, 10–100 мкл и 100–1000 мкл. На первый взгляд кажется, что то, что покупает клиент, охватывает практически весь спектр микропипетирования, и кажется, что все сделано идеально, но это не так! После многих лет послепродажного обслуживания пипеток мы собрали отзывы клиентов о таких проблемах, как неточное дозирование и трудности в использовании, которые часто возникают из-за первоначального выбора набора.Давайте возьмем самый распространенный пример: клиенты часто оставляют больше всего отзывов о пипетировании, когда используют пипетку объемом 10 мкл для переноса жидкостей в пределах 1 мкл. Теоретически пипетка с диапазоном измерения 0,5–10 мкл без проблем работает с жидкостями в пределах 0,5–1 мкл. Почему клиенты часто сообщают о наибольших проблемах именно в этом диапазоне измерений? Ниже 1 мкл — это работа с ультрамикрожидкостью. Количество жидкости практически незаметно невооруженным глазом. Базовые навыки работы с жидкостью очень высоки, такие как: промывка, глубина вставки и другие технические детали. Например: технические детали, такие как промывка, глубина уровня вставляемой жидкости и т. д. Кроме того, качество всасывающей головки также имеет большое значение. большое влияние на эту микрообъемную операцию. Некоторые всасывающие насадки низкого качества могут иметь остатки пластика на кончике всасывающей головки. Такие наконечники низкого качества имеют почти фатальные последствия для микропипетирования. При использовании наконечников нормального качества большинство операторов предпочитают использовать пипетки с диапазоном дозирования 0,1–2 мкл. Для операций по перекачке жидкости объемом менее 1 мкл эффект пипетирования значительно лучше, чем у пипеток с диапазоном 0,5–10 мкл.Ниже мы возьмем пипетку Yanbio в качестве примера для иллюстрации:Общий диапазон регулируемых пипеток обычной точности составляет от 0,1 мкл до 10 мл. Различные диапазоны показаны в таблице ниже:Название предметаКат.№Номинальный объемДиапазон громкостиПриращениеОдноканальная пипеткаYB-P2.52,5 мкл0,1-2,5 мкл0,05 мклYB-P1010 мкл1–10 мкл0,1 мклYB-P2020 мкл2–20 мкл0,1 мклYB-P100100 мкл10–100 мкл1 мклYB-P200200 мкл20-200 мкл1 мклYB-P10001000 мкл100-1000 мкл5 мклYB-P50005000 мкл1000-5000 мкл50 мклYB-P1000010 мл1–10 мл100 мкл8-канальная пипеткаYB-PM1010 мкл1–10 мкл0,1 мклYB-PM100100 мкл10–100 мкл1 мклYB-PM300300 мкл50-300 мкл1 мклYB-PM10001000 мкл100-1000 мкл5 мкл Разные модели пипеток имеют разные диапазоны. Когда мы выбираем пипетку, часто появляется определенный диапазон, и может хватить нескольких пипеток разных моделей. Как выбрать пипетку наиболее подходящего объема.Пример: требуется пипетка, а часто набираемый объем составляет 20 мкл. У нас есть четыре различных типа дозаторов жидкости: 2–20 мкл (модель YB-P20) / 5–50 мкл (модель YB-P50) / 10–100 мкл (модель YB-P100) / 20–200 мкл (модель YB-P200). Какая пипетка имеет наименьшую погрешность при объеме 20 мкл?В соответствии с нашей повседневной практикой выбора продуктов, мы считаем, что было бы наиболее целесообразно, если бы целевой объем находился в среднем диапазоне, и мы эмпирически выберем 5–50 мкл (модель YB-P50). Так ли это? Давайте посмотрим на результаты данных:Давайте воспользуемся этими четырьмя типами пипеток для анализа ошибок:Кот. Нет.:ОбъемОшибка на 20 мклYB-P2020-20 мкл±0,2 мклYB-P505-50 мкл±0,5 мклYB-P10010-100 мкл±0,6 мклYB-P20020-200 мкл±1,0 мклВидно, что пипетка объемом 2–20 мкл является наиболее подходящей с точки зрения точности и точности, а целевой объем 20 мкл является наиболее подходящим.     

ПЦР – революционный метод, позволяющий амплифицировать мельчайшие следы ДНК/РНК до рабочих количеств – является краеугольным камнем современных лабораторий. Однако даже опытные исследователи иногда сталкиваются с трудностями. Независимо от того, новичок ли вы в мире молекулярной биологии или хотите усовершенствовать свои навыки, это руководство познакомит вас с основными передовыми методами ПЦР и поможет выбрать правильный лабораторный инструмент может иметь решающее значение.Сердце амплификации: ваш ПЦР-аппаратВ основе каждой реакции ПЦР лежит ПЦР-машина, также известный как термоциклер. Этот сложный лабораторный инструмент автоматизирует термический цикл Процесс – быстрый нагрев и охлаждение образцов для облегчения денатурации, отжига и расширения. Современные термоциклеры обеспечивают невероятную точность, и многие из них оснащены расширенными функциями, такими как градиентный режим, позволяющий тестировать несколько температур отжига за один цикл. Это бесценно для оптимизации анализов и экономии времени.Устранение неполадок 101: контроль — это всёНезависимо от того, насколько продвинут ваш ПЦР-машина Хороший экспериментальный дизайн незаменим. Всегда включайте контроли!Если ваш положительный контроль не усиливается, проблема может заключаться в ваших реагентах, шаблоне ДНК/РНК, или ттермический цикл настройки.Проверьте мастер-микс: все ли реагенты добавлены правильно? пипетка откалиброван?Оцените качество шаблона: ваш ДНК/РНК деградировавший или нечистый?Проверьте ПЦР-машина калибровка: выполняет ли она каждый термический цикл правильно?Если ваш отрицательный контроль Показана амплификация, вероятно загрязнение. Всегда используйте фильтры и специальные зоны до и после ПЦР, чтобы избежать загрязнения ампликонами.Повышение специфичности амплификацииПроблемы со специфичностью? Вы не одиноки. Нежелательные полосы или низкий урожай часто можно решить с помощью следующих стратегий:Используйте полимеразы горячего стартаПопробуйте приземление или градиент ПЦРОптимизируйте условия термического циклаНо самое главное — продумайте дизайн своих праймеров с умом!Используйте праймеры длиной 18–24 п.н. с температурой плавления 50–60 °C.Проверьте содержание ГХ (в идеале 40–60%)Избегайте повторов и самокомплементарных последовательностейПроверить с помощью градиента ПЦР-машина чтобы найти идеальную температуру отжигаЛабораторные приборы, которые улучшают ваш рабочий процесс ПЦРВаш ПЦР-аппарат необходим, но другие лабораторные приборы не менее важны для успеха.Пипетки: точность имеет значение. Электронные пипетки с многорежимным дозированием ускоряют приготовление мастер-микса и снижают нагрузку на лабораторию. Для лабораторий с высокой производительностью 96-канальные пипетки или рабочие станции для работы с жидкостями могут стать настоящим прорывом.Термоциклеры С функцией градиента: Как уже упоминалось, не все ПЦР-аппараты одинаковы. Инвестирование в термоциклер с точной функцией градиента позволит оптимизировать анализы быстрее и с меньшими потерями реагентов.Заключительные советы для достижения совершенства в ПЦРВсегда используйте высококачественное, очищенное ДНК/РНК.Регулярно калибруйте пипетку.Пусть ваш ПЦР-машина станьте вашим партнером — изучите его особенности, обслуживайте его и проверяйте его калибровку.Если есть сомнения, используйте градиент. термический цикл.ПЦР — это одновременно искусство и наука. Благодаря вниманию к деталям и использованию подходящего лабораторного оборудования — от надёжной пипетки до высокоточного ПЦР-аппарата — вы всегда будете получать воспроизводимые результаты, готовые к публикации.